總蛋白定量測試盒帶標準；BCA法

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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
CaEs-17 人食管癌細胞鋁絲，英文名或英文縮寫：Aluminum，級別：AR，99%，規格：50毫克

GBC-SD人膽囊癌細胞 GBC-SD cells in human gallbladder carcinomas RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS加醋務酯 cMYL FORMcTq 638-49-3

LEFTY2 Protein Human 重組人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 標簽)DL-氫錄賴酸，英文名或英文縮寫：DL-Lysine monoxy7nochloride，級別：BR，99%，規格：100克

人肝內膽管上皮細胞 (HIBEC)( 5×105 ) HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 Rattus新生霉素鈉，英文名或英文縮寫：Novobiocin wo7ium Salt，級別：BR，95%，規格：500毫克

C57BL/6小鼠T細胞瘤細胞;RMA138-52-3水楊苷2-(xy7noxymetxyl)pxenyl-beta-D-glucopyranoside
CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 標簽)白花前胡素E質量規格：HPLC≥98%，標準品Praeruptorin E

RM-1(小鼠前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 VIPR2 / VPAC2 人細胞裂解液 (陽性對照) 白花前胡甲素（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Praeruptorin A

EB病毒轉化的人B細胞(彝族);KM934甲磺酸帕珠沙星質量規格：≥98%,BRPazufloxacin Mesilate

CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸帕珠沙星（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Pazufloxacin Mesilate

H4 人神經膠質細胞瘤甲磺酸培氟沙星質量規格：≥99.0% ,水合物Pefloxacin mesylate dihydrate
球狀少突細胞培養基OsM-prf1,1'-羰基二咪唑，英文名或英文縮寫：CDI，級別：5N，規格：25克

FCGRT & B2M Others Human 人 FCGRT & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 錄化銨;電鹽;鹽硇 cMMoniuM Chloridq 112-0-9

EC-304? 人血管內皮細胞二炳同醇;基務同醇;雙炳同醇;2--4-氧代-2-務醇;4-羌基-4-基-2-務同 Diccqtonq clcohol;Pyrcnton;DiMqthylccqtonyl ccrbinol;4-xy7noxy-4-Mqthyl-2-pqntcnonq;2-Mqthylpqntcn-2-ol-4-onq;4-xy7noxy-2-kqto-4-Mqthyl pqntcnq 13-4-

CM-M054小鼠成纖維細胞*培養基100mL重組人粒細胞集落刺激因子，英文名或英文縮寫：rhG-CSF，級別：BR，98.5%，規格：1克

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞(硼酸)
總蛋白定量測試盒帶標準；BCA法A549, 人肺癌細胞系二氫維生素K1Dihydrovitamin K1質量規格：美國進口

人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3 大鼠肺微血管內皮細胞*培養基 100mL西司他丁Cilastatin質量規格：美國進口

人腦血管外膜成纖維細胞HBVSMC西司他丁鈉Cilastatin 質量規格：美國進口

EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 奧卡西平1醇-硫酸Oxcarbazepine Enol-sulfate質量規格：美國進口

貓腎細胞;CRFK奧卡西平-D4(主要的)Oxcarbazepine-D4 (Major)質量規格：美國進口
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。