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      蘋果酸合酶(MS)測試盒可見分光光度法

      簡要描述:蘋果酸合酶(MS)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:硝酸鹽肉湯(還原)(軍團菌) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支/盒 馬尿酸鈉(軍團菌) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支/盒 尿素生化管(軍團菌) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 明膠液化生化管(軍團菌) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支/盒

      • 產(chǎn)品型號:
      • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      • 更新時間:2023-12-27
      • 訪  問  量:1041

      詳細介紹

      注意事項:

      1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

      2、對照管只需要做一管。

      3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

      4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

      對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

      若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

      特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

      產(chǎn)品名稱:蘋果酸合酶(MS)測試盒可見分光光度法

      產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

      檢測方法:可見分光光度法

      產(chǎn)品貨號:BK-01S6600

      產(chǎn)品分類:乙醛酸循環(huán)系列
      商品介紹:

      測定意義:

      蘋果酸合酶(MSEC 4.1.3.2)是屬于轉(zhuǎn)移酶中酰基轉(zhuǎn)移酶的一類,主要存在于植物和微生物中。MS是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,在MS催化下乙醛酸與乙酰反應(yīng)生成蘋果酸。

      測定原理:

      MS催化乙酰CoA和乙醛酸產(chǎn)生蘋果酸,同時生成,使無色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。

      需自備的儀器和用品:

      酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰、和蒸餾水

      所需的儀器和用品:

      可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

      四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

      建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

      樣本和試劑浪費!

      1、樣本制備

      組織樣本:

      取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

      勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

      【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

       

      細菌/細胞樣本:

      先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

      提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

      12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

      【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

      4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

      QQ截圖20220307153537.png 

      實驗方法學(xué):

      一、肝素的配制:

      市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

      肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

      二、血液樣本的收集:

      全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

      1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

      2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

      選擇抗凝的注意點:

      ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

      ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

      ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

      ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

      用于測定。

      麥康凱瓊脂(含結(jié)晶紫)  250g

      1瓶 L1210細胞株 L1210 低溫運輸和保存

      2216E液體培養(yǎng)基 2216E Liquid Medium 250g

      500U 天冬轉(zhuǎn)氨 Aspartate Aminotransferase -20℃保存

      500mL Sodium-free Lactated Buffered Ringer’s Solution Sodium-free Lactated Buffered Ringer’s Solution 常溫保存

      100mL RIPA裂解液(強) RIPA Lysis Buffer(S) 4℃保存

      500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.5   Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.5   常溫保存

      50次 一站式磁珠法動物mRNAout One-Step MAG Animal mRNA Isolation Kit 4℃保存

      2 ug pCMV-hyPBase pCMV-hyPBase 低溫運輸,-20℃保存

      Campy-Cefex瓊脂基礎(chǔ) Campy-Cefex Agar Base 250g

      10mg 辣根過氧化物 Peroxidase Horseradish(POD) 4℃保存

      蘋果酸合酶(MS)測試盒可見分光光度法P53(wt-p53)  瘤抑制基因抗體(野生型P53) 規(guī)格: 0.1ml

      GAD65  谷脫羧-65抗體(C端) 規(guī)格: 0.1ml

      CD133  造干細胞抗原CD133抗體 0.1ml

      RBM26  RNA結(jié)合蛋白26抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Phospho-Syk (Tyr323)  磷酸化非受體型酪蛋白激抗體 規(guī)格: 0.1ml

      CD33/Siglec-3  CD33抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

      AVPR2  加壓素受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml

      phospho-Bcl-xL/BCL2L1(Thr115)  磷酸化Bcl-xL蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

      Phospho-SMC1 (Ser360)  磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體 規(guī)格: 0.1ml

      HEXIM1/EDG1  雌激素下調(diào)基因1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 

       


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