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      脂蛋白酯酶(LPL)測試盒微量法

      簡要描述:脂蛋白酯酶(LPL)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:沙氏(EP) 英文名稱:Sabouraud-dextrose Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB) 英文名稱:Eosin-Methylene Blue Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g MH肉湯(MHB) 英文名稱:Mueller-Hinton Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g MH瓊脂(MHA) 英文名稱:Muell

      • 產(chǎn)品型號:
      • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      • 更新時(shí)間:2023-12-27
      • 訪  問  量:1107

      詳細(xì)介紹

      本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      檢測方法

      貨號

      脂蛋白酯酶(LPL)測試盒微量法

      100管/48樣

      微量法

      BK-01S6661

      商品介紹:

      測定意義:

      脂蛋白酯酶是脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、乳腺細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成的一種酶,可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯,以供組織氧化供能和貯存,并在不同的組織表現(xiàn)出不同的生理意義。

      測定原理

      脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產(chǎn)生4-硝基,在400nm有特征吸收峰。

      自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

      天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見分光光度計(jì)、微量石英比色皿。

      試劑組成和配制:

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
      11.png

      實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

      1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

      操作步驟:

      1. 樣品的準(zhǔn)備:

      a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

      e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

      2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

      b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

      c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      50次 DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(100-1500bp) DNAMETER 4℃保存

      2 ug pGEX pGEX 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      液體鹽培養(yǎng)基  250g

      1瓶 F81細(xì)胞株 F81 低溫運(yùn)輸和保存

      萘啶酮酸(5.0mg) Nalidixic Acid 5.0mg/支*5

      10000U 冷啟動核酸 Cold-active Nuclease 4℃遮光保存

      煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)顆粒 Brilliant Green Lactose Bile Broth 300ml/袋*10

      10mL 制溶液,2mg/mL Nystatin Solution -20℃避光保存

      2 ug pQBI-50-BFP pQBI-50-BFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      鼠李糖發(fā)酵管  20支

      2 ug pCCI pCCI 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      脂蛋白酯酶(LPL)測試盒微量法OCT6  八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子6抗體 規(guī)格: 0.2ml

      RNF130/  環(huán)指蛋白130抗體 規(guī)格: 0.2ml

      RGS19  G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格: 0.2ml

      SUMO-1/UBC9  泛素蛋白連接E2I抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Phospho-MARCKS(Ser170)  磷酸化丙蛋白激C底物Marcks抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1ml

      CDKN2B/p15 INK4b  細(xì)胞周期蛋白依賴性激抑制劑2B抗體 規(guī)格: 0.2ml

      APP695 (CT)  淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端) 規(guī)格: 0.1ml

      HSD3B7  滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β7抗體 規(guī)格: 0.2ml

      ICAM-2/CD102  細(xì)胞間粘附分子-2抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Mouse Anti-rat IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml

      NXPH2  神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml


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