PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。

原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱：PCR級MgSO4溶液 
產(chǎn)品規(guī)格： 詳見說明
產(chǎn)品貨號：BK-P96830
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點：
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

特異性熒光標(biāo)記：
TaqMan法
TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括絕對定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
尿酸，英文名或英文縮寫：Tricyanic acid，級別：AR，98%，規(guī)格：25克  人P2蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒 Human myelin protein two aibody IgG ELISA Kit
胰島素(牛)質(zhì)量規(guī)格：BR，27U/mg,進(jìn)分INSULIN  ELISAKitPAP人前列腺酸性1酸酶規(guī)格：48T/96T  大鼠白介素1β(IL-1β)試劑盒 Rat Ierleukin 1β,IL-1β ELISA Kit

L-天門冬氨酸鉀質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Aspartate Potassium  小鼠γ突觸核蛋白(SNCG)ELISA試劑盒 ，英文名： SNCG ELISA Kit  CLIAKitfoCCC5b-9(MouseterminalcomplemecomplexC5b-9)ELISAKit小鼠末端補體復(fù)合物C5b-9規(guī)格：48T/96T

輔酶Q10,泛醌質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCoenzyme Q10,Ubiquinone  大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒RatTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKIT 96T/48T  人體HLA-DPB1RFLP基因分析試劑盒20

輔酶Q10(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Coenzyme Q10  人Rho GDP解離抑制因子1(ARHGDIA/GDIA1)試劑盒 Human ARHGDIA/GDIA1 ELISA kit  ELISAKitTTN人抗肌聯(lián)蛋白抗體規(guī)格：48T/96T
蘇拉明鈉質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSuramin   人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA檢測試劑盒HumanSurfactaProteinA,SP-AELISAKit 96T/48T  HumanFreeThyroxine,FT4ELISA試劑盒人游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

彈性蛋白酶質(zhì)量規(guī)格：30 units/mgElastase, pancreatic from porcine pancreas  大鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒 Rat granzymes A,Gzms-A ELISA Kit  HumanierferoegulatoryFactor,IRFELISAKit人干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂肪酶質(zhì)量規(guī)格：20000U/g,BRLipase  英文名稱RatCRHELISAKit大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  鵝促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

木聚糖酶質(zhì)量規(guī)格：BR,6萬U/GXylanase from Trichoderma viride   活力伊紅(eosin-nigrosin)染色試劑盒50  人血吸蟲抗原試劑盒 Human schistosoma ELISA Kit
PCR級MgSO4溶液LX-2, 人肝星形細(xì)胞株氮酮5克

人臍靜脈平滑肌細(xì)胞2,2-雙(溴基)-1,3-炳二醇 2,2-Bis(bromomqthyl)propcnq-1,3-diol 396-90-0

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C 人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL棕櫚油酸

人胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90HalfFraser添加劑1米

COLEC12 Others Rat 大鼠 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3,4-二扶本胺3,4-Difluoroaniline